穩定細胞株篩選技術在生物技術工程中是一項非常常用的技術，通過這個操作，能夠篩選出可以穩定表達目的基因的細胞株。我們知道，穩定細胞株構建的目的就是為了能夠得到可以持續表達的細胞，所以，篩選過程類似提純的過程。那么，穩定細胞株篩選的一般流程是怎樣的呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊。

　　1、載體構建。選擇合適的載體，然后將目的基因的DAN序列或蛋白編碼序列克隆到合適的表達載體中，并構建成重組質粒;

　　2、細胞轉染。將構建好的載體通過試單更多技術轉染到目標細胞中(通常采用化學發、電穿孔法或病毒載體介導等方法)，通過細胞來進行目標蛋白的表達;

　　3、選擇標記引入。轉染后，將選中標記引入到細胞培養基中，從中挑選包含標記的細胞繼續培養，無標記的則剔除掉(這個方法對蛋白表達本身沒有太大意義，但是能夠幫助我們挑選出包含目的基因的細胞);

　　4、單克隆挑選。將進過篩選后的細胞進行單克隆培養，篩選出能夠穩定表達且高表達的細胞，并對其進行克隆;

　　5、穩定性驗證。對穩定細胞系進行驗證，確保目的基因的穩定高效表達;

　　6、功能性驗證。對穩定細胞株進行功能型驗證，以確保所得蛋白能夠我們的需求;

　　總的來說，穩定細胞株篩選是一個非常復雜的過程，需要具備相當程度的耐性和細心，知道獲得自己所需目的基因的細胞株為止。普健生物作為一家具備多年蛋白抗體制備和定制經驗的公司，專業為您提供穩定細胞株構建及篩選服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。