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盤點穩定細胞株構建時的常用步驟

發表時間:2023-07-04 訪問次數:1671

  之前我們和大家聊過穩定細胞株篩選,其實就是從構建的穩定細胞株中挑選出穩定表達且目的蛋白質量高的細胞株。今天,我們再和大家具體聊聊有關穩定細胞株構建的常用方法。

  總共的來說,穩定細胞株因為技術實力、儀器、原材料以及需求不同,其構建方法也是各不相同的,不過,常用的一些方法也大體相同。

  1. 轉染:這是最常用的方法之一,通過將目標基因的表達載體導入到目標細胞中實現。

  轉染的方法一般包括:化學轉染和病毒轉染兩種。

  化學轉染:使用化學物質(例如聚乙烯亞胺、磷脂體等)將表達載體引入細胞內。

  病毒轉染:使用病毒作為介導體,將表達載體傳遞到細胞中。常用的病毒載體包括腺病毒、逆轉錄病毒和腺相關病毒等。

  2.電穿孔:通過電脈沖的作用,在細胞膜上形成臨時的微孔,使表達載體得以進入細胞。這種方法可以在不使用病毒或化學物質的情況下實現轉染。

  3.瞬時轉染:這種方法不涉及穩定細胞株的構建,而是將目標基因的表達載體短暫地導入細胞中,使其在一段時間內表達目標基因或蛋白質。這可以用于快速評估目標基因的功能或進行臨時的表達實驗。

  在進行穩定細胞株構建時,我們常常會進行相關的標記,以便于在轉染后期進行相關的篩選工作,這樣,就能夠更加精確地讓我們獲得穩定細胞株。而且作為現階段使用相對廣泛的一種蛋白表達技術,穩定細胞株的重要性是不言而喻的,而且隨著技術的不斷發展,相信在不僅的將來,其使用將會更加的廣泛。普健生物專業為廣大用戶提供穩定細胞株構建服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。

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