穩定細胞株是一種用于大量且穩定表達蛋白的一種方式，不僅可以表達蛋白，而且還能進行相關藥物篩選以及基因表達，使用范圍非常的廣泛。但是，對于很多企業來說，都不會選擇通過構建穩定細胞株來表達蛋白，因為對于他們來說，穩定細胞株構建非常的困難，性價比相對較低。為什么穩定細胞株構建這么困難呢?下面，普健生物和大家具體聊聊。

　　我們知道，外源基因的表達主要采用兩種方式，一種是瞬時表達，另外一種是穩定表達。

　　瞬時表達：將外源DNA克隆到質粒中，而非將其整合到宿主細胞的染色體中。瞬時表達能夠迅速實現蛋白的表達，但是也只能持續幾天。瞬時表達的穩定性相對較差，而且在不同實驗中差異性較大，且無法長久;

　　穩定表達：直接將外源DNA整合到宿主細胞的染色體中，通過細胞篩選的方式，實現宿主細胞長期表達目的蛋白的方式;

　　但是，問題出現了。想要將外源基因整合到宿主細胞的染色體中相對困難，成功率非常的低，通常會發生隨機整合，表達水平會受到整合位置、周圍染色體原件等因素的影響。所以，如果我們想要獲得能夠進行穩定表達，則需要進行大量的篩選工作。

　　什么情況下需要構建穩定細胞株?

　　1、對于那些需要長期研究的目標細胞來說，可以通過構建穩定細胞株來實現;

　　2、對于一些半衰期極長，盡可以通過RNA干擾卻無法表達的蛋白，只有通過穩定細胞株來實現;

　　3、對于那些無法進行精確表達的細胞;

　　4、需要用到細胞的;

　　穩定細胞株的構建要點有哪些?

　　穩定細胞株構建是一個長期的過程，所以，從質粒構建、病毒包裝、細胞感染以到細胞篩選等過程，都需要引起注意，因為任何一個細節方面的錯誤都可能造成耗時大半年的項目付諸流水。

　　穩定細胞株構建能夠在極大程度上解決蛋白穩定表達的問題，對于一些需要長期制備或者需要進行細胞的長期研究時，都可以通過穩定細胞株來解決。當然了，對于穩定細胞株的構建，除了需要相關技術支持外，還需要有精細且細節方面的操作，只有在各個方面做好了，才能在更大程度上保證其構建成功。普健生物專業為廣大用戶提供穩定細胞株構建服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。