畢赤酵母表達是原核表達中最常用的方法之一，因為其遺傳背景清晰、表達安全、制備成本低等優點，使得在很多項目上都會優先考慮。但是，如何讓這些耗材產生最大價值，那就是我們保存和培養的問題了。為什么大公司在成本上要比小公司更低?因除了因為技術和儀器方面的原因外，對耗材的保存和培養也是很大的一個方面。

　　1、計算好酵母的倍增時間

　　據生物學統計，酵母的生長分裂會隨著一定的曲線來變化，通常一OD值來繪制。一般來說，酵母分裂曲線主要分為三個時期：延滯期、對數生長期以及穩定期，在對數期時，細胞分裂旺盛且細胞數目倍增。這個時候，我們需要主要補充營養，一旦營養耗盡，細胞分裂減緩，則會進入穩定期。所以，了解本增時間，能夠很好地讓我們安排實驗進程;

　　2、制備培養基

　　了解好OD圖后，我們就需要進行酵母菌的培養工作了。酵母的主要糧食是：酵母提取物(去除細胞壁的細胞成分)、蛋白胨以及糖分。培養基則是將酵母提取物和蛋白胨溶解于水中之后，通過高壓滅菌后，倒入到平板中，凝固后即是我們所需的培養基;

　　3、酵母的培養

　　將酵母細胞種到小體積的培養基中，并在30度的搖床或旋轉器上培養48小時。當然了，對于大規模培養如上的方式就不適合了，需要先確定酵母培養物的OD值，然后將其稀釋到起始OD值的0.1-0.2倍，然后再放到30度搖床上培養到所要的OD值;

　　4、酵母的存儲

　　平板培養可將培養基放置于4度環境下保存3個月，如果要得到新鮮培養物，則需要在新鮮培養基上重新規劃細胞。對于需要長期保存的酵母菌來說，可將其分別培養在不同的甘油管中，冷凍保存。一般來說，-80度環境下可以保存幾年;

　　酵母的健康可以或直接關系到我們后期實驗的結果，以及能否表達出我們想要的蛋白產品。如果這些工作做好了，不僅能更好地滿足我們的實驗需求，而且能夠在極大程度上降低實驗成本。武漢普健生物專業為廣大用戶提供酵母蛋白表達服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。

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