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有關鼠單克隆抗體制備的詳細過程

發表時間:2022-09-28 訪問次數:3620

  自從雜交瘤細胞技術被建立以來,這種既能分泌抗體,又能無限增殖的雜交融合細胞技術就得到了廣泛的使用。它能大量產生同一種抗體,而且是針對同一抗原的高度同質化的抗體,這種抗體我們稱之為單克隆抗體(單抗,monoclonal antibody)。下面,普健生物就和大家具體聊聊有關鼠單克隆抗體制備的詳細過程。

  基本過程如下:

  1、將抗原注入小鼠體內;

  2、培養小鼠一定時間;

  3、獲取小鼠脾臟,獲得脾細胞;

  4、通過雜交瘤技術,將其B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,獲得雜交瘤細胞(不僅具備B細胞特性,同時可以無限增殖);

  5、篩選出優質的雜交瘤細胞;

  6、對篩選出來的雜交瘤細胞進行鑒定和克隆(也就是我們常說的雜交瘤細胞株);

  目前雜交瘤技術的使用變得越發的廣泛,還有更多的潛力等待我們開發。相對于抗血清來說,能減少大量動物和費用。而且其純度高,均一性好,更適合藥物生產和臨床使用。

  獲得雜交瘤細胞株后,我們通常會通過如下兩個方法來產生單克隆抗體。

  1、小鼠腹水。將雜交瘤細胞接種到小鼠腹腔內,在獲得腹水的同時,可以通過純化獲得抗體。這個方法操作相對簡單,花費較少,重復性高,但是傷害動物,如果需要實現大規模生產,則需要使用到大量的小鼠;

  2、細胞培養。直接培養雜交瘤,提取其上清液中的抗體。這個方法適合大規模生產,只是獲得的抗體所包含的雜質較多,可能會產生一些影響到當體純度的雜蛋白;

  如上,便是有關鼠單克隆抗體生產的全部過程,可以說,如上的方法都存在著一定的局限性,純度高的方法對動物傷害較大,大規模生產的方法則含雜質較多。所以,我們在日常實驗中,需要結合自己的實際來選擇合適的方法,以滿足我們單克隆抗體生產的需求。更多鼠單抗生產的知識,敬請關注普健生物。

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