桿狀病毒昆蟲細胞表達系統(Baculovirus Expression Vector System, BEVS)是一種以昆蟲細胞為宿主細胞，依托桿狀病毒為外源基因載體，從而實現外源基因表達的表達系統。在生物制備領域中，昆蟲桿狀病毒表達系統是一種強大的工具。

　　桿狀病毒昆蟲表達系統的制備流程：

　　1、質粒構建。將提取出的目的基因插入到桿狀病毒基因中(主要是線性或環狀的DNA質粒);

　　2、細胞轉染。將構建的質粒轉染到選定昆蟲細胞中，使得目標基因得以表達;

　　3、蛋白表達。對所得細胞進行培養，使得目標基因得以轉錄和翻譯，從而實現目標蛋白的表達;

　　4、蛋白包裝。將病毒顆粒釋放到培養基中，從而獲得以及純化所需目的蛋白;

　　桿狀病毒昆蟲表達系統的常用方法：

　　1、轉染方法。轉染的方法很多，比如鈣磷沉淀法、電穿孔法等;

　　2、標記方法。利用對表達載體進行標記，從而實現細胞的篩選;

　　桿狀病毒昆蟲表達系統的優勢：

　　1、安全性高。因為制備過程中僅采用桿狀病毒來轉染昆蟲細胞，不會感染到其他細胞，所以不會對人體造成影響;

　　2、表達高效。通過各種酶的使用，使得蛋白得以正確折疊以及翻譯后修飾，從而實現復雜蛋白的表達;

　　3、適合大規模生產。昆蟲細胞可以在無血清的培養基中生長，從而實現大規模生產;

　　4、應用廣泛。在蛋白功能研究、藥物發現研究等方面有著廣泛的使用;

　　桿狀病毒昆蟲表達系統的局限性：

　　1、表達不穩定。因為病毒存在一定的毒性，其會造成宿主細胞的裂解，從而影響蛋白的穩定性;

　　2、糖基化水平低。當我們對蛋白進行糖基化時，可能會造成單的不穩定以及免疫原性;

　　3、基因組不穩定。桿狀病毒基因組會存在一定的不穩定性，從而影響到蛋白的長期表達和穩定性;

　　桿狀病毒昆蟲表達系統的注意事項：

　　1、需要選擇合適的表達系統。結合目的蛋白的性質來選擇合適的表達載體，從而確保載體與目的基因的相容性;

　　2、對表達條件進行優化。對于不同的昆蟲細胞，需要結合其感染以及培養條件，選擇最優的培養條件;

　　3、對實驗進行合理地設計。相對其他表達系統來說，桿狀病毒昆蟲表達系統存在一定的復雜性，需要對其實驗過程進行合理地設計;

　　桿狀病毒昆蟲表達系統存在著極大的優勢，不僅高效，而且在蛋白修飾方面有著極大的優勢，為生物學以及制備領域研究有著極大的優勢。通過對其原理以及流程、操作等方面的調整，能夠更好地實現蛋白的表達。當然了，這套蛋白表達系統也存在著一定的不足之處，需要結合具體的情況來進行選擇。更多蛋白表達的相關知識，敬請關注武漢普健生物。