抗體提純在抗體應(yīng)用中是非常重要的一種手段，它能夠有效提升抗體的特性，降低所產(chǎn)抗體的副作用。所以，抗體純化操作具備非常重大的意義。而每個企業(yè)在生產(chǎn)工藝、技術(shù)水平等方面存在極大的差異，所以純化方法也是各不相同。不過總體算來主要有親和層析法、離子交換層析法、尺寸排阻色譜法以及殊死作用色譜法。今天，普健生物就在這里和大家具體聊聊這四種方法。

　　1、親和層析法

　　親和純化是一種通過可逆反應(yīng)達到分離純化的技術(shù)，更適合用來從成分復(fù)雜并且雜質(zhì)的含量要遠高于目標蛋白的提純。先通過瓊脂糖與介質(zhì)進行偶聯(lián)，使得其結(jié)合成為具備相關(guān)特異的介質(zhì)，然后通過配體進行選擇性地吸附，再通過平衡液清洗掉雜質(zhì)，從而提取到我們需要的目的抗體;

　　2、離子交換層析法

　　這個方法的原理是利用帶有電荷的溶質(zhì)分子，通過其與帶有相反電荷的固定化離子交換基團之間發(fā)生可逆的相互作用。抗體本身就是一種蛋白，它可以在一定PH值的緩沖液中點解成離子，我們可以通過鄧店點pl來進行離子交換層析實驗，提取出該層的離子后，再通過改變緩沖液的PH值分離出目標蛋白的目的;

　　3、尺寸排阻色譜法

　　這個分離方法相對溫和，所選尺寸排阻的分離原理主要取決于分子其在溶液中的體積。當我們將溶液加入純化柱時，其分子會按照其尺寸進行從大到小地分離。分子小的流動速度相對緩慢，大的分子會被快速排出。所以，通過分子的大小進行純化，就能夠進行有效且快速地篩選;

　　4、疏水作用層析法

　　疏水作用層析法其實就是利用鹽-水體系中疏水基團和層析介質(zhì)的疏水配基之間疏水力的不同而進行分離的一種層析方法。這種方法就是利用變形后的蛋白暴露出的疏水殘基，或者在高鹽環(huán)境下暴露于分子表面的疏水殘基，依次用從高至低離子強度洗脫液將疏水用作由弱至強的組分進行分離的方式;

　　或許又有人要問了：這四種蛋白純化方法，哪種方法更好呢?總的來說，這四種方法各有優(yōu)勢，當然也各有不足之處，需要結(jié)合抗體的來源、時間需求、成本預(yù)算以及抗體用途等一系列的需求進行考慮，選擇一種最適合的蛋白純化方式。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供蛋白純化服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。