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抗體純化過程中能有效提升效率的幾個方式

發表時間:2022-11-28 訪問次數:819

  抗體純化在我們生物實驗中是必不可少的一步,它不僅能提純蛋白來提升蛋白結合的效率,而且能夠減少其他物質對實驗結果的影響。可以說,蛋白純化是后續實驗能否更加精確的保證。但是,在蛋白純化過程中,我們常常會遇到很多問題,這些問題可能會造成蛋白純化率不高,更有甚者會造成蛋白出現更多雜質的情況。今天,普健生物就和大家具體聊聊有關蛋白純化中一些可能會影響到純化效率的幾個內容。

  說到蛋白純化,其實原理很簡單,它就是通過一些工藝分離出和產品相關的一些雜質,以達到獲得高純度、低潛在危害物的蛋白產品(主要去除過程中細胞、細胞碎片、宿主蛋白、宿主細胞核以及培養液中的一些養料成分)。而在蛋白純化過程中,第一步就是離心和過濾。

  在實驗室中,純化和離心只需要單次離心即可完成,而在大規模蛋白純化中,則需要連續分離的方式,通過深層過濾、切向流過濾和連續流離心等方式來進行。

  深層過濾相對簡單且前期的投入少。因為深層過濾介質的孔徑分步廣,內表面積大,能夠通過孔徑截留和吸附雙重作用達到過濾的效果。但是其本身不能達到無菌過濾,只能起到初步純化的效果;

  切向流濾器的使用則相對廣泛一些,因為其流向可以減少細胞在膜表面的沉積,實現大體積細胞液不堵塞的效果。其主要使用中空纖維,表面積大,能夠在孔腔內形成高剪切力;

  連續流離心則是采用碟片式離心機進行連續離心,大規模純化中則采用分離模式。其原理相對簡單,離心機腔體為錐形,收獲液靠近軸心,離心后通過軸心排出,細胞則在離心力的作用下聚集在錐形底部。但是設備的操作相對復雜,更加容易出現故障,需要一定的專業技術能力;

  總的來說,離心為純化的第一步,只有做好了這一步,才能為后續的純化過程打好基礎。而我們上面提到的幾種方法,需要結合實際情況來進行選擇,搭配好相應的處理方式,這樣才能更好地得到我們所需要的結果。普健生物專業為廣大用戶提供蛋白純化服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。

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