噬菌體展示技術在新藥研發方面有著廣泛的使用，在之前我們和大家聊過有關噬菌體的相關只是，大家可以點擊“什么是噬菌體展示技術?它的主要作用有哪些?”去詳細了解一下。后來有很多客戶問到有關噬菌體展示文庫構建方面的知識，有鑒于此，我們在這里統一和大家聊一聊。

　　什么是噬菌體展示文庫構建?

　　我們知道，噬菌體展示技術就是通過將外源基因插入到噬菌體蛋白外殼基因的適當位置，讓其隨著噬菌體的傳代，在子代噬菌體表面得到展示，而后通過篩選和淘選的過程后，獲得我們所需蛋白的方式。而噬菌體展示文庫則是多種不同外源基因噬菌體的集合。

　　如何構建噬菌體展示文庫?

　　1、淘選

　　利用靶點抗原或者細胞組織和噬菌體文庫作用，淘選出能夠和靶點特異性結合或者功能的展示噬菌體，洗脫下來擴增，經過兩到五輪淘選，富集和擴增陽性噬菌體文庫 。

　　2、篩選

　　對陽性噬菌體文庫進行單克隆挑選，通過高通量的測序和功能學實驗(ELISA)確定單一的能夠和靶點抗原蛋白結合的抗體片段的蛋白序列和基因序列 。

　　噬菌體文庫構建的一般流程

　　1、提取所需RNA或mRNA;

　　2、對多色RNA或mRNA進行反轉錄，獲得第一鏈cDNA;

　　3、通過多個引物，將cDNA庫中的輕重鏈復制并擴增出來;

　　4、在引物上增加酶切位點，再次擴增出cDNA中的輕重鏈;

　　5、利用技術手段將輕鏈基因和重鏈基因拼接到一起;

　　6、將拼接的輕重鏈整合到噬菌體質粒上;

　　7、擴增建立噬菌體TG1庫;

　　8、通過進一步擴增和純化，獲得噬菌體文庫;

　　噬菌體文庫的質量主要有文庫的大小、文庫抗體可變區的多樣性、基因片段層次分步等方面，所以，我們在判斷一個噬菌體文庫好壞時，完全可以從這幾個方面入手查看。普健生物專業為廣大用戶提供噬菌體文庫構建服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。